Chromatographie
In der Biotechnologie erfordert die Proteinreinigung im Downstream Prozess in der Regel einen oder mehrere Schritte der Flüssigkeitschromatographie.
Photometrische und elektrochemische Inline-Sensoren von optek wurden speziell für Echtzeitmessungen und -Überwachungen konzipiert. Zuverlässige und reproduzierbare Messdaten stellen sicher, dass die Schneidekriterien (Pooling) bei der Fraktionierung streng eingehalten werden können, um eine maximale Ausbeute mit optimaler Qualität zu erzielen.
optek Produkte für die Chromatographie
Chromatographieüberwachung vor der Säule (Pre-Column)
Der Inline Leitfähigkeitssensor ACF60 mit integriertem Temperaturfühler und der pH Adapter PF12 ermöglichen die Messung von Leitfähigkeit-, Temperatur- und pH Messungen in Echtzeit.
Chromatographieüberwachung hinter der Säule (Post-Column)
Während der Reinigung ist eine präzise, verlässliche und reproduzierbare Messung hinter der Säule (Post-Column) erforderlich, um präzises Pooling und somit maximale Ausbeute und Reinheit von Protein-/DNA-Fraktionen zu erzielen.
Die Inline Installation im Säulenablaufstrom optimiert diesen Trennschritt durch den optek UV-Sensor AF45 (mit einer Wellenlänge) oder AF46 (mit zwei Wellenlängen). Dies garantiert Produktreinheit und reduziert den Aufwand von Offline-Tests und manuellen Analysen.
optek AF46-VB Zweikanal-UV-Absorptionssensor mit Kalibrieradapter
Mit einem NIST-rückführbaren Filterpaket können Anwender Inline-Sensoren schnell und reproduzierbar kalibrieren.
Der große Messbereich des Leitfähigkeitssensors ACF60 ermöglicht die Überwachung von Pufferlösungen und ist ebenso hervorragend geeignet, um z.B. Reinigungsprozesse (WFI-Wasser) zu kontrollieren. Der pH Adapter PF12 ermöglicht die sichere Montage handelsüblicher pH Elektroden. So ist beim Packen einer Chromatografiesäule der pH Wert ein wichtiger Parameter und zusätzlich wird das Gleichgewichtsverfahren überwacht und die Säulenintegrität gewährleistet.
Zwei Wellenlängen
optek ACF60 Leitfähigkeitssensor und PF12 pH Elektrodenadapter montiert auf einer Biotech-Armatur
Die Konzentration von Proteinen wird üblicherweise bei einer Wellenlänge von 280 nm gemessen. Neben der Messung bei 280 nm kann die Produktkonzentration gleichzeitig bei einer zweiten Wellenlänge, z.B. 300 nm bestimmt werden. Da das Signal bei gleicher Produktkonzentration bei der langwelligeren Messung signifikant niedriger ist als bei 280 nm, kann ein deutlich größerer Konzentrationsbereich dargestellt werden.
Im Verlauf der Fraktionierung ermöglicht die Messung bei 280 nm bereits bei niedrigen OD-Werten (Optische Dichte) eine hohe Auflösung an den Schnittpunkten. Dagegen kann die zweite Wellenlänge genutzt werden, um während der Elution gleichzeitig die gesamte Signalkurve ohne Signalverluste im Bereich hoher Proteinkonzentrationen (hohe OD-Werte) abzubilden.
Aus den Messsignalen bei den Wellenlängen 254 nm und 280 nm kann der Reinheitsgrad bzw. die Kontamination von Proteinlösungen durch Nukleinsäuren (DNA/RNA) beurteilt werden. Das modulare Konzept der optek Inline Sensoren ermöglicht, dass die optische Pfadlänge (OPL) an die Applikation angepasst werden kann. Abhängig von dem zu erfassenden Konzentrationsbereich werden optimale OPL und Wellenlängenkombination ausgewählt, um höchste Reproduzierbarkeit und Linearität zu erzielen.
C8000 – 8 Messungen von 5 Sensoren mit einem einzigen hochpräzisen Konverter
In einer Anlage zur chromatographischen Trennung werden i.d.R. folgende Messungen benötigt:
Messungen vor der Säule (PRE-Column):
kombiniert in einer Messzelle für niedriges Totraumvolumen
- Leitfähigkeit (optek ACF60)
- Temperatur (optek ACF60)
- pH (optek PF12)
Messungen nach der Säule (POST-Column):
kombiniert in zwei Messzellen für niedriges Totraumvolumen
- Zweikanal UV (optek AF46)
- Leitfähigkeit (optek ACF60)
- Temperatur (optek ACF60)
- pH (optek PF12)
optek C8000 Universeller Konverter
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